ANOTACE

Bylo publikováno, že delece genu PLC1 kódujícího fosfolipázu C (Plc1) u kvasinky Saccharomyces cerevisiae způsobuje zvýšenou citlivost buněk na teplo. Mechanismus působení Plc1 za teplotního stresu zůstává nejasný. Zjistili jsme, že absence Plc1 ovlivňuje také apikální růst buněk mutantů yck1 a yck2 , což ukazuje na vliv Plc1 na funkci kaseinkinázy Hrr25. Při řešení dané diplomové práce bychom se chtěli zaměřit na analýzu vlivu Plc1 na dynamiku stresových granulí po teplotním šoku. Budou připraveny nové kmeny obsahující nefunkční fosfolipázu C a produkující fluorescenčně značené kaseinové kinázy Yck2 a Hrr25. Jako markery stresových granulí budou fluorescenčně označeny proteiny Rpg1 a Ubp3. Granularita buněk bude vyhodnocena pomocí programu oCellaris. Růstové vlastnosti v průběhu kultivace kvasinek po teplotním šoku budou analyzovány pomocí spektrofotometru EON. Aktivita kinázy Hrr25 v delečním mutantu Plc1 po teplotním šoku bude analyzována imunochemicky.